贴壁细胞培养的主要特点是细胞必须附着在固相表面才能增殖。这类细胞多来源于实体组织，此类细胞的细胞膜表面存在特定的黏附分子，能与培养容器表面的电荷或基质蛋白结合，形成稳定的附着。在培养过程中，细胞会沿着表面延展，呈现出成纤维状、上皮样或多角形等形态，并逐渐形成单层细胞层，当细胞密度达到一定程度时会因接触抑制停止生长。​

悬浮细胞则无需依赖固相表面，可在液体培养基中自由悬浮生长。这类细胞多来源于血液、淋巴组织或某些肿瘤细胞系，此类细胞通常为球形或近球形，能通过细胞间的轻微聚集形成小细胞团。悬浮细胞的生长不受接触抑制影响，可在培养基中达到较高的细胞密度。

适合贴壁培养细胞类型

细胞类别	代表细胞系/原代细胞	依赖贴壁的原因
正常体细胞	人真皮成纤维细胞、肝细胞	依赖ECM提供生存信号，离体后易凋亡
上皮细胞	肠上皮细胞（Caco-2）、肾小管上皮细胞	极性结构维持需基底膜接触
干细胞	胚胎干细胞（ESC）、诱导多能干细胞（iPSC）	未分化状态依赖基质胶（Matrigel）
实体瘤细胞	乳腺癌MCF-7、肝癌HepG2	保留原组织黏附特性

适合悬浮培养的细胞类型

细胞类别	代表细胞系	悬浮适应性机制
血液/免疫细胞	Jurkat（T细胞）、THP-1（单核细胞）	天然存在于流动环境中
杂交瘤细胞	小鼠骨髓瘤细胞（如SP2/0）	恶性转化后失去接触抑制
驯化细胞系	CHO-S、HEK293-S、MDCK-S	基因改造或长期驯化获得悬浮特性
昆虫细胞	Sf9、High Five™（BTI-TN5B1-4）	无血清培养基技术成熟

 

贴壁细胞培养对容器表面处理有特殊要求。传统的培养瓶、培养皿需经过表面改性（如包被胶原蛋白、多聚赖氨酸），以促进细胞黏附。在传代操作中，需使用胰蛋白酶等消化酶使细胞脱离表面，经过离心分离后重新接种。

悬浮细胞培养则可采用摇瓶、搅拌式生物反应器等设备，无需表面处理。传代时只需按比例稀释细胞悬液即可，操作简便，适合自动化和规模化生产。搅拌式生物反应器通过叶轮的温和搅拌使细胞保持悬浮状态，同时保证氧气和营养物质的均匀分布，其培养体积可从几升到数千升不等，能满足工业化生产的需求。此外，悬浮细胞培养体系更易进行在线监测和调控，如 pH 值、溶氧量、葡萄糖浓度等关键参数可实时调整，提高了培养过程的稳定性和可重复性。​